Estudió en la Universidad de Indiana y a continuación en la prestigiosa academia de interpretación Juilliard School de Nueva York.
En 1972 Kline se incorporó a una compañía teatral en Nueva York, con la que también realizó giras por todo el país interpretando obras de Shakespeare. Tuvo éxito en los escenarios y más adelante ganó dos premios Tony, galardones equivalentes a los Óscar, por su actuación en dos musicales. También participó en algunas producciones para televisión. En 1981 Kline decidió probar suerte en Hollywood, donde consiguió un papel en la película La decisión de Sophie. Su interpretación le valió una nominación a un Globo de Oro. A partir de esta nominación, Kline se convirtió en un actor conocido y apreciado lo que le valió apariciones cinematográficas constantes, interpretando roles de buena exigencia actoral. Por su actuación en Un pez llamado Wanda, en 1988, ganó el Óscar al mejor actor de reparto.
Kline es un actor capaz de interpretar personajes muy distintos, ya sean históricos, dramáticos o cómicos, logrando un importante realismo y credibilidad en sus actuaciones. Aunque en varias de sus películas se ha ganado el calificativo de estrella, es él mismo que prescinde de ello. Cuando sus obligaciones se lo permiten, vuelve al teatro para interpretar una o dos obras.
Kline está casado desde 1989 con la actriz Phoebe Cates y tiene dos hijos.
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